Isis 校读型DNA聚合酶 ——高精确的即用型酶

Isis 校读型DNA聚合酶

——高精确的即用型酶

MPBIO(Qbiogene)公司的Isis 校读型DNA聚合酶(Isis Proofreading DNA Polymerase)性能优异，尤其适合对碱基错配有严格要求的PCR反应，它具有如下优点：

*比TaqDNA聚合酶的精确度高40倍

*即用型

*无需改变反应条件

*可解读二级结构

更精确40倍

Isis DNA聚合酶错配率极低，比TaqDNA聚合酶的精确度高40倍，在PCR循环中其错配机率约为一千六百万分之一。

真正的即用型

该酶使用非常方便，它具有强大的DNA聚合酶活性和 3’ 至 5’ 核酸外切酶活性，无需 3’ 末端引物保护，因此您能更快地完成反应的设计和优化步骤。

高度耐热

Isis 是耐热能力最强的校读型DNA聚合酶，因此在PCR反应中它较好地保持活性，反应产量更高。该酶阅读复杂二级结构时，可根据需要延长变性时间和升高温度。

在变性温度渐高的条件下，比较Pfu、Taq和Isis DNA聚合酶的扩增结果。以10ng的?-球蛋白为模板，50picomoles的未保护引物，dNTP各100μM，扩增420bp片段。

PCR 程序：

A：( 5’ at 93°C ) x 1 – ( 1’ at 91°C , 1’ at 62°C , 1’ 15 at 72°C ) x 30

B：( 5’ at 95°C ) x 1 – ( 2’ at 95°C , 1’ at 62°C , 1’ 15 at 72°C ) x 30

C：( 5’ at 95°C ) x 1 – ( 1’ at 97°C , 1’ at 62°C , 1’ 15 at 72°C ) x 30

D：( 5’ at 95°C ) x 1 – ( 1’ at 99°C , 1’ at 62°C , 1’ 15 at 72°C ) x 30

MW(分子量Marker)是pBR322 Hae III/Taq I.

富含GC模板的理想选择

Isis DNA聚合酶耐热性强， 90°C 孵育5小时仍保留90%的酶活性， 100 °C 孵育5小时可保留50%的酶活性，因此反应中变性时间和温度的设定有更大的弹性，特别适合富含GC模板。

获得高精确度

使用Isis 孵育缓冲液，dNTP各40μM，Isis DNA聚合酶可保证反应的最高保真度。在标准PCR反应中，1600个分子的1kb双链DNA只存在错配一个碱基的概率，其精确度与Pfu聚合酶相当。

用途  

PCR克隆

研究RNA转录中等位基因的多态性

确定单细胞或单个DNA分子的等位时相

鉴定组织的稀有突变

鉴定培养细胞

扩增富含GC模板或含二级结构模板

订购信息

厂家说明  

MP Biomedicals生物医学公司是位于美国加利福尼亚州的知名生命科学和生物技术厂商。2004年底成功收购Qbiogene、ICN，现在全球有5个大型仓库，能够及时供应各行业需求，亚洲仓库位于新加坡。它致力于生命科学领域的基础研究和探索。目前它提供55000多种产品，是世界上能全面提供生命科学产品和临床诊断产品的几家厂商之一。