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翌圣生物科技（上海）股份有限公司品牌商
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自营
翌圣生物（Yeasen）
试剂/耗材
已认证品牌介绍
翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
已认证品牌介绍
义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
自营
翌圣生物（Yeasen）
试剂/耗材
已认证品牌介绍
翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
已认证品牌介绍
义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
自营
翌圣生物（Yeasen）
试剂/耗材
已认证品牌介绍
翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
已认证品牌介绍
义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
酶切法建库试剂 DNA裂解试剂(DNA Fragmentation Reagent)
￥1140
品牌商
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
入驻年限：19 年
- 联系人：
翌圣生物
- 所在地区：
上海
- 业务范围：
体外诊断、耗材、技术服务、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、试剂
- 经营模式：
生产厂商
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公司新闻/正文
酶切法PCR-Free建库，1h/1ng极速建库
1732 人阅读发布时间：2020-10-20 10:00
高通量测序中，常规的文库构建需要PCR扩增，一方面，是为了对微量DNA样本进行扩增，提高文库产量，另一方面，可以放大荧光信号，让测序仪更容易捕获和识别荧光信号，提高测序准确度。但是，PCR就像一把“双刃剑”，在解决了样本起始量低的问题并起到放大荧光信号作用的同时，却也引入了扩增错误和偏向性，不能完美地呈现基因组序列“真实面貌”。因此，PCR-Free技术的引入，既具备了PCR的优势，也克服了PCR的缺点。
酶切法PCR-free建库试验验证
实验目的：
验证酶切法PCR-free建库试剂盒最低样本投入量。
实验描述：
不同来源样本，不同投入量，统一酶切12min不分选，进行PCR-free建库，使用qubit定量文库并通过2100核实文库条带分布。
结果展示：
注：由于部分接头残留，Qubit检测文库浓度最终大于样本的投入量。
酶切法PCR-free建库试剂盒，样本最低投入可低至1ng。
对照试验，实验条件与上述酶切建库一致，验证低投入量机械法建库产量与酶切法差别。
实验描述：
不同来源的样本，统一机械打断，用相同的比例分选出300bp大小的插入片段，选择投入1/5/10 ng分选产物进行PCR-free建库，使用qubit定量文库并通过2100核实文库条带分布。
结果展示：
注：由于部分接头残留，Qubit检测文库浓度最终大于样本的投入量。
机械法PCR-free建库试剂盒，1/5/10 ng投入文库产出与酶切法相近。
由上述两个实验可以看出，酶切法PCR-free建库低投入量实验完全可以达到机械法建库的效果，而且建库流程精简，无需复杂的机械片段化过程，一步完成片段化/末端修复/加A ，1h即可完成整体的建库流程，是目前快速建库的不二之选。
产品推荐
化了末修加 A 以及接头连接体系，极大增加了文库转化效率，适合用于病原微生物 mNGS 领域的快速建库。
产品特点：
图1：PCR-Free技术优势
酶切法PCR-free建库试验验证
验证酶切法PCR-free建库试剂盒最低样本投入量。
实验描述：
不同来源样本，不同投入量，统一酶切12min不分选，进行PCR-free建库，使用qubit定量文库并通过2100核实文库条带分布。
结果展示：
| 建库信息 | 12209试剂盒（片段化/末修/加A+接头连接） | ||||||||||||||
| 模板 | NA12878 | 小牛胸腺 | E.coli | ||||||||||||
| 编号 | A1 | A2 | A3 | A4 | A5 | A6 | A7 | A8 | A9 | A10 | A11 | A12 | A13 | A14 | A15 |
| 投入量-ng | 1 | 5 | 10 | 50 | 145 | 1 | 5 | 10 | 50 | 180 | 1 | 5 | 10 | 50 | 186 |
| 回溶体积-μl | 5 | 10 | 10 | 21 | 21 | 5 | 10 | 10 | 21 | 21 | 5 | 10 | 10 | 21 | 21 |
| Qubit-ng/μl | 0.25 | 0.6 | 1.23 | 3.02 | 8.72 | 0.29 | 0.5 | 1.31 | 3.5 | 11 | 0.22 | 0.55 | 1.43 | 3.46 | 11.4 |
| 产量-ng | 1.25 | 6 | 12.3 | 63.42 | 183.12 | 1.45 | 5 | 13.1 | 73.5 | 231 | 1.1 | 5.5 | 14.3 | 72.66 | 239.4 |
注：由于Y接头结构的影响，2100不能准确分析PCR-free真实文库大小；电泳图-文库主带约在380-400bp。
图2：A5、A10、A15 PCR-free文库电泳图及A3、A8、A13 2100峰图
结论：酶切法PCR-free建库试剂盒，样本最低投入可低至1ng。
机械法PCR-free建库试验验证
实验目的：对照试验，实验条件与上述酶切建库一致，验证低投入量机械法建库产量与酶切法差别。
实验描述：
不同来源的样本，统一机械打断，用相同的比例分选出300bp大小的插入片段，选择投入1/5/10 ng分选产物进行PCR-free建库，使用qubit定量文库并通过2100核实文库条带分布。
结果展示：
| 建库信息 | 12201（末修/加A+接头连接） | ||||||||
| 模板 | NA12878 | 小牛胸腺 | E.coli | ||||||
| 编号 | B1 | B2 | B3 | B4 | B5 | B6 | B7 | B8 | B9 |
| 投入量-ng | 1 | 5 | 10 | 1 | 5 | 10 | 1 | 5 | 10 |
| 回溶体积-μl | 5 | 10 | 10 | 5 | 10 | 10 | 5 | 10 | 10 |
| Qubit-ng/μl | 0.256 | 0.59 | 1.2 | 0.28 | 0.53 | 1.01 | 0.24 | 0.52 | 1.13 |
| 产量-ng | 1.28 | 5.9 | 12 | 1.4 | 5.3 | 10.1 | 1.2 | 5.2 | 11.3 |
注：超声分选模板-主带大小300bp，即PCR-free文库大小约420bp
图3：超声分选模板2100峰图（左）及B3、B6、B9文库2100峰图（右）
结论：图3：超声分选模板2100峰图（左）及B3、B6、B9文库2100峰图（右）
机械法PCR-free建库试剂盒，1/5/10 ng投入文库产出与酶切法相近。
总 结
根据Qubit值判断，酶切法PCR-free建库高低投入量均有文库产出，且低投入量文库产出与机械法PCR-free建库相当。文库2100峰图显示PCR-free文库有微量接头残留，实验时接头用量需根据实际情况进行调整。（注：实际样本操作时，建议选用qPCR文库定量，可更直观显示有效文库产量）由上述两个实验可以看出，酶切法PCR-free建库低投入量实验完全可以达到机械法建库的效果，而且建库流程精简，无需复杂的机械片段化过程，一步完成片段化/末端修复/加A ，1h即可完成整体的建库流程，是目前快速建库的不二之选。
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化了末修加 A 以及接头连接体系，极大增加了文库转化效率，适合用于病原微生物 mNGS 领域的快速建库。
产品特点：
- 适用样本类型广：适用1ng-1μg的基因组DNA、全长cDNA等样本
- 无偏好性：高质量片段化酶，可随机切割双链DNA，酶切片段无偏好性
- 超高品质酶学组成：业界领-先的文库转化率，最高可达80%以上
- 品质稳定：严格的批次性能与稳定性质控
| 产品类型 | 名称 | 货号 |
| 建库试剂盒 | Hieff NGS® OnePot PCR-free DNA Library Prep Kit | 12209ES08/24/96 |
| 片段化/末修/加A模块 | Hieff NGS® Fast-PaceTM DNA Fragmentation Reagent | 12609ES24/96 |
| 快速连接模块 | Hieff NGS® UltimaTM DNA Ligation Module | 12604ES24/96/98 |
| 长接头 | Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina® | 12615/6/7/8ES04/16 |
| 磁珠 | Hieff NGS® DNA Selection Beads | 12601ES03/08/56/75 |
| 文库定量 | dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES60/76 |
| Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix | 12302ES05/09 | |
| Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard 1-6 | 12307ES09 |