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翌圣生物科技（上海）股份有限公司品牌商
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自营
翌圣生物（Yeasen）
试剂/耗材
已认证品牌介绍
翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
已认证品牌介绍
义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
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翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
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义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
文献支持
基质胶-类器官培养基
￥1855 - 3355
品牌商
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
入驻年限：19 年
- 联系人：
翌圣生物
- 所在地区：
上海
- 业务范围：
体外诊断、耗材、技术服务、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、试剂
- 经营模式：
生产厂商
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公司新闻/正文
人肺类器官培养手册
763 人阅读发布时间：2023-03-31 10:07
新冠病毒在病变的晚期会大面积感染肺组织，可能会对肺功能造成严重的损害。在过去三年中，人类干细胞衍生的类器官已经成为了新冠研究的有利工具。
人肺类器官(human lung organoid, hLOs)拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，培养过程复杂。研究人员利用小分子化合物和细胞因子诱导干细胞生成了内胚层，再让内胚层形成三维组织，得到了类似胚胎中早期肺的组织，进一步使其发育成为肺部组织。
人肺类器官培养方案有很多种，接下来，我们根据Han和Alyssa J Miller等文章总结了人类多能干细胞(hPSC)形成人肺类器官和芽尖祖细胞类器官的大致过程[1][2]。
培养方案
01 hPSC定向分化为内胚层 hPSCs用Accutase (40506ES)处理并接种到低吸附的6孔板上，重悬于含有10 μM Y-27632 (53006ES)、0.5 ng/mL human BMP4 (92053ES)、2.5 ng/mLhuman bFGF (91330ES)、100 ng/mL human Activin A (91702ES)的无血清分化培养基中培养3-4天。
02 诱导形成前肠球体 为诱导前肠球体，更换培养基为前肠分化培养基：DMEM/F12培养基中添加1× N-2 (60706ES)、1× B27 (60704ES)、10 mM HEPES (60117ES)、1× L-谷氨酰胺(60314ES)、10 µM SB431542 (53004ES)、200 ng/mL human Noggin (92528ES)、1 µM SAG(53257ES)、500 ng/mL human FGF4 (91303ES)和2 µM CHIR99021 (53003ES)，培养5天。
然后在不破坏单层细胞的情况下收集漂浮的球体，离心后转移至新的离心管中，接种至含有Matrigel胶的平板中，37°C静置。
图2 前肠球体的明场图片[2] 03 诱导人肺类器官和芽尖祖类细胞器官 3.1 诱导人肺类器官 向前肠球体中加入人肺类器官诱导培养基：DMEM/F12培养基中添加1× N-2 (60706ES)、1× B27 (60704ES)、1% FBS、10 mM HEPES (60117ES)、1× L-谷氨酰胺(60314ES)、500 ng/mL human FGF10(91306ES)进行培养，每两周换液。
大约需要50天可以产生人肺类器官，并且具有气道样上皮细胞，周围环绕着间充质细胞和表达肺泡细胞型标记物的上皮细胞的弥散网络。
图3 人肺类器官预期生长模式的明场图像[2]
3.2 诱导芽尖祖细胞类器官 向前肠球体中加入人肺类器官诱导培养基：DMEM/F12培养基中添加1× N-2 (60706ES)、1× B27 (60704ES)、10 mM HEPES (60117ES)、1× L-谷氨酰胺(60314ES)、10 ng/mL humanFGF7 (91304ES)、0.5% BSA (36102ES)、50 µg/mL抗坏血酸(53614ES)、3 µM CHIR99021 (53003ES)、50 nM ATRA(53001ES)和0.4 µM monothio-glycerol，进行培养，每2-3天换液，会生成芽尖祖细胞类器官。
培养22天后，芽尖祖细胞类器官含有高度富集和增殖的、转录类似于人类胎儿芽尖祖细胞的SOX2+ - SOX9+ ID2+ NKX2.1+种群细胞。
图4 芽尖祖细胞类器官生长模式的明场图像[2] 相关产品
参考文献 [1] Han Y, et al. Identification of SARS-CoV-2 inhibitors using lung and colonic organoids. Nature. 2021 Jan;589(7841):270-275.
[2] Miller AJ, et al. Generation of lung organoids from human pluripotent stem cells in vitro. Nat Protoc. 2019 Feb;14(2):518-540.
人肺类器官(human lung organoid, hLOs)拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，培养过程复杂。研究人员利用小分子化合物和细胞因子诱导干细胞生成了内胚层，再让内胚层形成三维组织，得到了类似胚胎中早期肺的组织，进一步使其发育成为肺部组织。
人肺类器官培养方案有很多种，接下来，我们根据Han和Alyssa J Miller等文章总结了人类多能干细胞(hPSC)形成人肺类器官和芽尖祖细胞类器官的大致过程[1][2]。
图1 Alyssa J Miller等的hPSC形成人肺类器官和芽尖祖细胞类器官的过程[2]
培养方案
01 hPSC定向分化为内胚层 hPSCs用Accutase (40506ES)处理并接种到低吸附的6孔板上，重悬于含有10 μM Y-27632 (53006ES)、0.5 ng/mL human BMP4 (92053ES)、2.5 ng/mLhuman bFGF (91330ES)、100 ng/mL human Activin A (91702ES)的无血清分化培养基中培养3-4天。
02 诱导形成前肠球体 为诱导前肠球体，更换培养基为前肠分化培养基：DMEM/F12培养基中添加1× N-2 (60706ES)、1× B27 (60704ES)、10 mM HEPES (60117ES)、1× L-谷氨酰胺(60314ES)、10 µM SB431542 (53004ES)、200 ng/mL human Noggin (92528ES)、1 µM SAG(53257ES)、500 ng/mL human FGF4 (91303ES)和2 µM CHIR99021 (53003ES)，培养5天。
然后在不破坏单层细胞的情况下收集漂浮的球体，离心后转移至新的离心管中，接种至含有Matrigel胶的平板中，37°C静置。
图2 前肠球体的明场图片[2]
大约需要50天可以产生人肺类器官，并且具有气道样上皮细胞，周围环绕着间充质细胞和表达肺泡细胞型标记物的上皮细胞的弥散网络。
图3 人肺类器官预期生长模式的明场图像[2]
培养22天后，芽尖祖细胞类器官含有高度富集和增殖的、转录类似于人类胎儿芽尖祖细胞的SOX2+ - SOX9+ ID2+ NKX2.1+种群细胞。
图4 芽尖祖细胞类器官生长模式的明场图像[2]
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 简介 |
| Y-27632 | 53006ES | 1 mg/5 mg/10 mg | ROCK抑制剂 |
| SB431542 | 53004ES | 5 mg/10 mg/50 mg | Src家族激酶抑制剂，TGF-β信号通路抑制剂 |
| CHIR99021 | 53003ES | 2 mg/5 mg/10 mg | GSK-3α/β抑制剂 |
| Smoothened Agonist (SAG) | 53257ES | 2 mg/5 mg/10 mg | Smo受体激动剂 |
| L-Ascorbic acid L-抗坏血酸 | 53614ES | 1 g/5 g | 维生素C，抗氧化剂 |
| Retinoic acid（维甲酸，维A酸） | 53001ES | 100 mg/500 mg/1 g | 诱导细胞分化 |
| Accutase™ 细胞消化液 | 40506ES | 100 mL | 细胞消化液 |
| human BMP4 | 92053ES | 10 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human bFGF | 91330ES | 10 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human Activin A | 91702ES | 10 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human Noggin | 92528ES | 5 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human FGF4 | 91303ES | 5 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human FGF10 | 91306ES | 5 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| human FGF7 | 91304ES | 10 μg/100 μg/500 μg | 重组蛋白 |
| N-2 supplement,serum free,100X | 60706ES | 5 mL | 用于细胞和组织体外培养 |
| HEPES溶液(1 M)，细胞培养级 | 60117ES | 100 mL | 化学缓冲剂 |
| L-谷氨酰胺 | 60314ES | 100 g | 氨基酸 |
| BSA牛血清白蛋白,诊断级别 | 36102ES | 25 g/100 g/500 g/1 kg | 用于细胞培养 |
| 50× B-27无血清添加剂，去除维生素A | 60704ES | 10 mL | 无血清添加剂 |
参考文献 [1] Han Y, et al. Identification of SARS-CoV-2 inhibitors using lung and colonic organoids. Nature. 2021 Jan;589(7841):270-275.
[2] Miller AJ, et al. Generation of lung organoids from human pluripotent stem cells in vitro. Nat Protoc. 2019 Feb;14(2):518-540.