上新 | 双链甲基化建库重磅上市，助力表观遗传学研究

01 表观遗传 1942 年，Conrad Waddington 创造出了“表观遗传学”一词，用以定义基因型未发生改变而表型改变的现象，以解释发育的各个方面。大约 3/4 个世纪以后，我们发现基因表达模式传递的表观遗传机制并不依赖于 DNA 序列的改变，而是通过改变染色质的状态，而染色质状态同时是我们遗传信息的生理学形式。表观遗传的调控机制包括多种方式，图1主要介绍其中的3种：DNA甲基化、组蛋白修饰（图1中显示乙酰化和甲基化修饰）和非编码RNA导的调控。

 

 

02 表观遗传与人类疾病 DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA等表观遗传因素，与肿瘤发生、免疫缺陷病、神经系统疾病、心血管疾病和精神疾病等多种疾病相关。DNA甲基化就像一顶“神奇的帽子”，在不改变DNA分子一级结构的情况下调节基因组的功能，在调控基因表达、维持染色质结构、基因印记、X染色体失活以及胚胎发育等生物学过程中发挥着重大的作用。   01 肿瘤

正常的DNA甲基化模式如果被破坏(如基因启动子区域的甲基化程度过高或过低)都会导致细胞的癌变。

  02 免疫缺陷疾病

ICF综合征,是由DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因突变而引起的。患者1号、9号和16号染色体异常，在其着丝粒附近具有大量重复的典型卫星DNA序列，这些重复序列表现为低甲基化。

  03 精神类疾病

瑞特综合征是由于X染色体上编码MeCP2转录因子的基因突变导致的。MeCP2突变导致该基因调节DNA甲基化的过程异常，从而致病。

 

DNA甲基化研究离不开甲基化转化和甲基化建库

甲基化建库的方式有哪些呢？

 

 

翌圣生物推出先建库后转化的甲基化研究方案，与您一起探索DNA甲基化的奥秘！

 

03 产品简介

Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®是针对Illumina^®高通量测序平台开发的双链DNA甲基化建库试剂盒。本试剂盒通过连接相应的甲基化接头，经亚硫酸氢盐或酶法转化处理，再经过一步扩增即可构建针对Illumina^®平台测序的甲基化文库。

04 产品亮点    

 

• 所有组分均通过质量控制和功能验证，以确保文库的稳定产出；
• 支持多种类型DNA样本，包括gDNA、cfDNA和FFPE等；
• 兼容10 ng-1000 ng DNA的样本投入量，并兼容市面主流的转化方案

     

 

05 建库原理

图2.双链甲基化建库原理

 

06 产品性能
01 文库产量及下机数据对比测试    

选择不同的样本进行机械法片段化（除cfDNA），包括10ng 、100ng、1μg的293T gDNA，50ng FFPE DNA，100ng 水稻 DNA和10ng cfDNA，样本中掺入1% λDNA，采用Hieff^® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit（12223ES）进行文库转化和Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina（12214ES）进行双链甲基化建库，性能评估结果如下：

 

12214文库产量、Mapping(%)、Clean/Raw(%)、Dup%优于竞品1！

 

图3.不同样本不同投入量的文库浓度

 

图4.不同样本不同投入量的Clean/Raw(%)

 

图5.不同样本不同投入量的Map Ratio(%)

 

图6.不同样本不同投入量的Dup(%)

 

甲基化双链建库，λ DNA的转化率＞99.8%！

 

图7.双链甲基化建库对样本转化率的评估

 

07 ^Hot 订购信息

 

 

产品名称	产品货号	产品规格
Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®双链DNA甲基化建库试剂盒	12214ES08	8T
	12214ES24	24T
	12214ES96	96T

08 相关产品

 

产品名称	产品货号	产品应用
Hieff® DNA Bisulfite  Conversion Kit	12222ES	柱式-亚硫酸氢盐转化
Hieff® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit	12223ES	磁珠法-亚硫酸氢盐转化
Hieff® DNA Trans-Enzymatic methyl- Conversion Kit	12213ES	反向-酶法转化
Hieff® DNA Pos-Enzymatic methyl- Conversion Kit	12212ES	正向-酶法转化
Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina® V2	12221ES	甲基化建库
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase	10145ES	甲基化转化后PCR扩增