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624 人阅读发布时间:2024-08-14 17:35
Endonuclease IV(核酸内切酶IV)又称为Nfo,是一种多功能的核酸内切酶。它主要功能是识别DNA链中的脱嘌呤/脱嘧啶位点(AP位点),通过切割AP位点5'端的磷酸二酯键,产生3'-羟基和5'-脱氧核糖磷酸末端(dRP)(图1)。此外,该酶还具有在DNA的3´末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5´-磷酸和磷酸的3'-二酯酶活性;以及在DNA链上从3'—5'方向移除核苷酸的3'-5'外切酶活性。

图1. Endonuclease IV反应原理示意图
Endonuclease IV可用于:
FFPE样本修复中水解AP位点行成切刻,为DNA修复提供关键起始位点;
单细胞凝胶电泳(彗星试验);
碱洗脱、碱解旋等。
翌圣酶研发团队潜心研发,成功推出市售Endonuclease IV(Cat#14543ES),翌圣Endonuclease IV不含非特异性DNA酶残留,大肠杆菌宿主gDNA残留<0.05 copies/10U。
20 μL反应体系中,加入不同批次的100 U Endonuclease IV和 0.5 μg λDNA-HindⅢ digest,37℃孵育16 h,琼脂糖凝胶电泳DNA谱带不发生变化,表明翌圣Endonuclease IV不含非特异性DNase残留。

图2. 非特异性DNase残留
对不同批次的翌圣Endonuclease IV进行宿主(E.coli)基因组DNA残留检测,结果显示翌圣Endonuclease IV的宿主gDNA残留<0.05 copies/10 U。

图3. 宿主gDNA残留
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产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
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DNA损伤修复 |
T4 Endonuclease V |
14542ES |
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Endonuclease IV |
14543ES |
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Endonuclease VIII |
14536ES |