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翌圣生物科技（上海）股份有限公司品牌商
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自营
翌圣生物（Yeasen）
试剂/耗材
已认证品牌介绍
翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
代理
Sino Biological
抗体/蛋白质/抗原/多肽
已认证品牌介绍
义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
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翌圣生物科技（上海）股份有限公司是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
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义翘神州（Sino Biological）始终秉承“为全球生命科学研究人员提供高品质的重组蛋白和抗体等科研工具试剂以及一站式技术服务”的理念，坚持自主开发，不断提升技术水平，以创新的精神、先进的技术、严格的质量控制体系为基石，全面致力于以客户需求为导向，不断优化产品品质和服务体验，打造国际一流生物试剂品牌，赢得全球客户的信赖和好评。
品牌商
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
入驻年限：19 年
- 联系人：
翌圣生物
- 所在地区：
上海
- 业务范围：
体外诊断、耗材、技术服务、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、试剂
- 经营模式：
生产厂商
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公司新闻/正文
（单/多）定点突变随心变
4293 人阅读发布时间：2021-07-29 13:39
（单/多）定点突变随心变
—想变哪里变哪里
定点突变技术是利用PCR等技术定向改变基因的特定碱基序列，是研究基因功能和蛋白功能的一种非常有用的手段。通过该技术，可迅速，高效提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，从而来阐明目的基因的调控机理，以及下游实验中的蛋白质结构与功能的关系。
—想变哪里变哪里
翌圣生物推出的全新定点突变试剂盒基于Hieff Clone® 快速克隆技术的定点突变系统，目标质粒扩增产物经DpnI消化、Hieff Clone®重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。高效快速的实现直接对目标质粒中的靶位点进行单点突变，多点突变，以及插入或缺失等。
产品优势
应用范围广：可进行单点，多点突变
扩增性能优越：超高保真酶可扩增长度小于20kb的任何质粒
高效DpnI酶：可充分有效降解未突变的质粒模板
操作流程
1. 引物设计与目标质粒扩增
反向PCR引物中需引入同源臂和突变位点。
2. DpnI 消化质粒模板
质粒模板来源于大肠杆菌，为dam甲基化修饰，对DpnI敏感而被切碎。反向PCR合成的带突变位点的线性化质粒因没有甲基化而不被切开。
3. 重组反应
同源臂在重组酶的作用下进行重组。
图1. 进行单碱基（或多碱基）定点突变实验流程
部分发表文献
[1]. Jiang, Y., et al., Plants transfer lipids to sustain colonization by mutualistic mycorrhizal and parasitic fungi[J]. Science, 2017.（IF37.205）
[2]. Liu C X, Li X, Nan F, et al. Structure and degradation of circular RNAs regulate PKR activation in innate immunity[J]. Cell, 2019.（IF31.398）
[3]. Xing, Y.H., et al., SLERT Regulates DDX21 Rings Associated with Pol I Transcription[J]. Cell, 2017. 169(4): p. 664-678.e16. （IF31.398）
[4]. Wang Y, Hu SB, et al. Genome-wide screening of NEAT1 regulators reveals cross-regulation between paraspeckles and mitochondria[J]. Nat Cell Biol. 2018 Oct;20(10):1145-1158.（IF 20.46）
[5]. Li X., et al., Coordinated circRNA Biogenesis and Function with NF90/NF110 in Viral Infection[J]. Mol Cell. 2017 Jul 20;67(2):214-227.e7.（IF14.548）
[6]. Yao R W, Xu G, Wang Y, et al. Nascent Pre-rRNA Sorting via Phase Separation Drives the Assembly of Dense Fibrillar Components in the Human Nucleolus[J]. Molecular cell, 2019.（IF14.548）
FAQ
Q1. 请问单点突变/多点突变是否都是每个位点设计一对引物？是否都包括碱基/氨基酸突变，碱基插入和缺失？碱基插入/缺失的最大长度是多少?是否可以进行连续氨基酸的突变，氨基酸的数量限制是多少？
A1：单点突变/多点突变是每个位点设计一对引物；正反向引物可以包括碱基/氨基酸突变，碱基插入和缺失，也可以将这些放在一条引物上；碱基插入/缺失的最大长度没有限制，可为任何长度；可以进行连续氨基酸的突变，无特别数量限制。
Q2. 引物设计的原则是什么？有无官网的引物设计软件，若没有，推荐几个好用的引物设计软件。
A2：引物设计基本原则是使扩增产物末端有同源序列即可。无官方设计软件，推荐软件Primer5，Vector NTI。
Q3. 本试剂盒可以进行多点突变，能够同时进行几个位点的突变? 突变效率如何?进行单点突变的突变效率是多少？
A3：最高同时突变6个独立位点（每个位点之间相距超过100bp）。突变效率非常高（单次反应500多个克隆，阳性率超过95%）。
Q4. 该kit不含有感受态细胞，推荐的感受态细胞是哪些？
A4：Top-10、DH5α、JM109等常规感受态。
订购信息
| 应用 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
| 单碱基、不连续双碱基 | Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒 | 11003ES10 | 10 T |
| 三至五个不连续位点 （相距超过50bp） |
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒 | 11004ES10 | 10 T |
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| 10149ES03 | 1 mL | |
| 10149ES08 | 5×1 mL | |
| 2 × Hieff® Robust PCR Master Mix（With Dye) | 10106ES03 | 1 mL |
| 10106ES08 | 5×1 mL | |
| 2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye) | 10102ES03* | 1ml |
| 10102ES08* | 5×1ml | |
| YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) YeaRed 核酸染料（10,000× 水溶液） | 10202ES76 | 500 μL |
| Agarose琼脂糖 | 10208ES60 | 100 g |
| GoldBand 1kb DNA ladder | 10510ES60* | 100T |
| 10510ES80* | 10*100T |