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反转录试剂盒 AdvanceFast 1st Strand

cDNA Synthesis Kit (No Dye)
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  • ¥285 - 1395
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 11150ES
  • 上海翌圣
  • 2026年02月25日

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    • 英文名

      Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (No Dye)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      -20度

    • 规格

      10T(11150ES10)/100 T(11150ES60)

    规格:10T(11150ES10)产品价格:¥285.0
    规格:100 T(11150ES60)产品价格:¥1395.0

    产品描述

    Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (No Dye)是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (No Dye)开发的快速反转录试剂盒,适用于PCR扩增以及RT-qPCR实验。与Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (No Dye)相比,具有稳定的检出率、特异性、产量保证,且反转录总时长最快可低于6分钟,大大缩短了实验时间。
    该试剂盒包含gDNA Digester Mix,可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。该试剂盒提供两种cDNA合成引物:Random Primers N6和Oligo (dT)18,用户可根据需要,选择Random Primers N6,Oligo (dT)18或Gene Specific Primers作为反转录引物,合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR或者qPCR反应。

     

    产品组分

    产品细节图片1

    组分编号 组分名称 产品编号/规格
    11150ES10(10 T) 11150ES60(100 T)
    11150-A 4× Hifair®AdvanceFast SuperMix (No Dye) 50 μL 500 μL
    11150-B 5×gDNA Digester Mix 20 μL 200 μL
    11150-C Random Primers (50 μM) 20 μL 200 μL
    11150-D Oligo d(T)18 Primers (50 μM) 20 μL 200 μL
    11150-E RNase-free Water 200 μL 1 mL* 2

     

    运输和保存方法

    冰袋运输。-20℃保存,有效期12个月。反转录产物可立即用于后续反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

     

    第一链cDNA合成操作步骤

    一、若实验需要去除残留基因组DNA 
    1. gDNA消化
    在RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

    组分 使用量
    RNase-free H2O To 10 μL
    5× gDNA Digester Mix 2 μL
    Total RNA 10 pg -5 μg*
    or mRNA 10 pg-500 ng*

    2. 反转录反应体系配制(20 μL体系)

    组分 使用量
    上一步的反应液 10 μL
    4×Hifair®AdvanceFast SuperMix (No Dye) 5 μL
    Oligo d(T)18 Primers(50 μM) 2 μL
    or Random Primers (* for qPCR)(50μM) or 2 μL
    RNase-free Water To 20 μL

    【注】:1)引物投入量可根据模板投入量调整,如果反转录产物用于qPCR实验,可在体系中按推荐量添加Random Primers。
      2)建议先加入4× Hifair®AdvanceFast SuperMix (No Dye) 混匀后再加入反转录引物,以保证引物不受gDNA Digester影响。
      3)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。
    3. 反转录程序设置

    温度 时间
    55℃ 5 min
    85℃ 5 s

    二、若实验无需去除基因组DNA
    1. 反转录反应体系配制(20 μL体系)

    组分 使用量
    4×Hifair®AdvanceFast SuperMix (No Dye) 5 μL
    Oligo d(T)18 Primers(50 μM) 2 μL
    or Random Primers (* for qPCR) (50μM) or 2 μL
    Total RNA 10 pg -5 μg
    or mRNA 10 pg - 500 ng
    RNase-free Water To 20 μL

    2. 反转录程序设置

    温度 时间
    55℃ 5 min
    85℃ 5 s

    【注】:1.建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低,可增加投入量至最多5 μg Total RNA。
    2.引物投入量可根据模板投入量调整,如果反转录产物用于qPCR扩增实验,需在体系中添加Random Primers。
    3.对于高GC含量模板或者复杂模板,可将反转录温度提高到60℃。
    4.本产品可合成14 kb以下的cDNA序列,如需得到更长的cDNA产物,可适当延长反转录时间。
     

    注意事项

    1)所有操作均应在冰上进行,且操作过程应避免RNase污染。 
    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
    3)本产品仅作科研用途!
     

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