无需纯化DNA的多样本直接PCR

背景
    动物基因型鉴定或植物基因型分型等实验，经常需要通过抽提纯化基因组DNA，以备后续进行PCR扩增目的基因进而判定基因型。当大规模批量化进行多样本基因型鉴定分析时，抽提基因组的步骤不但费时费力，而且大大增加实验成本。

产品介绍
    翊圣生物开发出独特的蛋白酶裂解缓冲体系，可最大程度地释放不同来源类型样品的基因组DNA。通过改造DNA聚合酶，优化PCR反应体系，大大地提升了DNA聚合酶对PCR抑制物的抵抗力。基于此，翊圣生物开发出的直接PCR试剂盒系列产品，可快速高效的进行PCR反应。
翊圣主要提供4类Direct PCR Kit，包括动物直接PCR试剂盒、小鼠直接PCR试剂盒、植物直接PCR试剂盒和血液直接PCR试剂盒。

工作原理


产品优势
★样品需求量小 —— 少到5mg动物组织、1mg植物叶片即可进行实验。
★操作简便 —— 使用独特的蛋白酶裂解体系，无需研磨、破碎等特殊处理，操作简便。
★处理快速 —— 20min快速释放质量稳定的基因组DNA。
★粗制样品PCR —— 无需进行费时而昂贵的DNA纯化。
★扩增性能强 —— 优化的PCR体系，使PCR具有更高的特异性、更强的PCR反应抑制物耐受性。

产品应用
植物基因型分型、动物基因型鉴定、血液中微生物鉴定等。

产品选择指南

产品特点	Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒	Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠组织直接PCR试剂盒	Plant Tissue Direct PCR kit 植物组织直接PCR试剂盒	Animal Blood Dicrect PCR Kit 全血直接PCR试剂盒
适用生物类型	小鼠、兔子、鸟类、淡水鱼	小鼠、大鼠	水稻、玉米、烟草、油菜、小麦、大豆等多糖多酚含量低的植物	人血、鼠血、鸡血、鸟血、牛血、狗血
适用组织类型/材料类型	脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、羽毛末端	鼠尾、鼠耳、脚趾（带肌肉）和其他脏器	叶片、幼苗	EDTA、Heparin 抗凝全血、血液的采集卡、冷冻血和抗凝血等
使用量（范围）	5-10mg	5-10mg	3-5mg（5-7mm）	人血2-45%；鼠血2-20%；采集卡1-4mm
裂解方式	蛋白酶裂解			无需裂解
裂解时间	65℃，10-30min	65℃，10-30min	95℃，10min	-
裂解液保存时间	4℃，2天；-20℃，10-20天			-
PCR产物最适长度	＜1kb	＜1kb	＜1kb	＜1kb
PCR产物是否加A	裂解反应体系加A效率不定
50µL PCR反应体系中裂解产物使用量	0.5-5µL，不可超过10µL	0.5-5µL，不可超过10µL	5-10µL，不可超过15µL	人血2-45%；鼠血2-20%；采集卡1-4mm

 
实验数据


FAQ

常见问题	可能原因	解决方法
阳性对照、待测样本均无条带。	PCR反应体系或反应条件不合适。	使用梯度PCR摸索PCR最佳反应条件。
	PCR试剂保存不当失去活性。	2× PCR Mix应保存于-20℃，使用时避免反复冻融。若使用频繁，可在4℃短时间存放。
	引物设计问题。	尝试重新设计引物进行检查。
阳性对照有目的条带，待测样本无条带或条带弱。	不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。	使用新鲜的试剂。
	加入组织裂解液过量。	增大反应体系，或减少裂解液的用量。
	样本裂解混合液保存不当或保存时间过久，DNA基因组已经降解。	裂解混合液液可在4℃保存2-3天，尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。
	模板加入量不适合。	在反应体系10-20%范围内优化模板加入量。反应效性能较差时，可以降模板浓度调节到低于10%的范围。
	PCR循环数不足。	增加PCR的循环数，推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂，PCR反应要比用纯化的DNA模板多5-10个循环为佳。
非特异性扩增	PCR退火温度太低，循环数、引物浓度或模板浓度太高。	增加PCR退火温度，降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。
	PCR引物错配。	重新设计PCR引物。
	配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。	PCR反应体系的配制在低温下进行，配制完成后尽快进行PCR扩增反应。
阴性对照出现目的条带	操作工具或试剂污染。	实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。
	样本间交叉污染。	每个取样器只对一个样本使用；或取完一个样本后，将取样器刃口浸入2%的次氯酸钠溶液中，反复涮洗，然后用干净的纸巾擦干残液。

订购信息

产品货号	产品名称	规格	价格（元）
10180ES50	Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒	50T	326.00
10180ES70		200T	1236.00
10181ES50	Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠组织直接PCR试剂盒	50T	326.00
10181ES70		200T	1236.00
10182ES50	Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR试剂盒	50T	326.00
10182ES70		200T	1236.00
10183ES50	Plant Tissue PCR Kit 植物组织直接PCR试剂盒	50T	326.00
10183ES70		200T	1236.00

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