精品推荐 | 这款酶在多重PCR扩增体系里表现很好！

哪些应用方向可优选Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase呢？

图1.Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的应用方向

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以上这些应用展示了Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase在分子生物学研究中的多功能性和高效性，使其成为实验室中不可或缺的工具之一。

多重PCR (Multiplex polymerase chain reaction，MPCR) 是指通过一次PCR反应同时对多个靶标进行扩增，结合一定的检测手段对扩增产物进行检测从而实现对多个靶标进行诊断的技术。MPCR具有高效率、高通量、低成本的特性而被深入研究。

多重PCR微生物多样性检测的应用非常广泛，尤其是原核生物16S的多重PCR扩增测序。16S扩增子测序是指利用合适的通用引物扩增环境中微生物的16S rDNA/18S rDNA /ITS高变区或功能基因，通过高通量测序技术检测PCR产物的序列变异和丰度信息，分析该环境下的微生物群落的多样性和分布规律，以揭示环境样品中微生物的种类、相对丰度、进化关系等。16S扩增子测序的技术路线如下：

图2. 16S扩增子测序的技术路线

样本：土壤DNA 10 ng

一轮PCR：25μL体系，扩增28个循环，MGI平台16S引物（16S-V3-V4,16S-V4），扩增酶2×Hieff NGS^® HG Multiplex PCR Master Mix（13283ES）

二轮PCR：25μL体系，第一轮产物投入量50 ng，扩增6个循环，扩增酶包含Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase及另外两种高保真扩增酶，0.9x纯化，50μL洗脱

• 引物16S-V3-V4扩增的文库主峰在600bp左右，引物16S-V4扩增的文库主峰在500bp左右，扩增条带与理论文库条带吻合；

• 第二轮PCR扩增时，在两种扩增引物体系下12928相对扩增酶A和扩增酶B的扩增能力最强，文库产量最高。