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基因测序越来越得到临床的认可，尤其是精准医疗概念提出以后，更是备受青睐，为精准治疗解答很多未知的问题。高通量测序技术的跨越式发展，使测序能力大幅上升，在整个NGS工作流程中，磁珠是必不可少的产品。磁珠通过磁颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理，将样本中目的片段分离。可实现对核酸样本的高通量自动化操作，广泛应用于基因测序以及分子诊断领域。

在日内瓦当地时间3月11日，世界卫生组织（WHO）将新型冠状病毒肺炎（COVID-19）列为全球性“大流行”病（Pandemic），其影响程度远超2003年的“非典”（传染性非典型肺炎，SARS），这也是因冠状病毒引起而首次被评定为全球“大流行”病的传染病。

常规转录组测序（RNA-Seq）主要是在转录水平上对逆转录的cDNA进行NGS测序，这样可以全面快速地获取某一物种在某一状态下的几乎所有转录本，包括mRNA和非编码RNA。目前转录组测序主流的方法是芯片法和RNA-Seq法。

dsDNA Assay Kit for Qubit®是Yeasen生物开发的专门用于Qubit®荧光仪或荧光酶标仪的试剂盒，线性范围0.2-100 ng，即使在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，也可以选择性的检测dsDNA，且耐受较高浓度的蛋白质、盐类、洗涤剂等污染物。

mRNA-seq不仅可以提供准确且极高灵敏度的量化基因表达，还可以识别已知的和新的转录异构体、基因融合和其他特征及等位基因特异性表达。当前已迅速成为分析疾病状况，生物过程以及转录组分析的首.选方法。

YEASEN蛋白marker，采用超纯且已精确校准的蛋白作为标准，可直接上样。分子范围高达10-245 kDa，条带浓度高达0.1-0.4 mg/mL，具有靓丽清晰的条带和宽泛的条带范围，可在PAGE、Western Blotting等蛋白实验中全程监测电泳进程、评估转印效率、可靠定位您的目的蛋白！

Hieff NGS® MaxUpII DNA Library Prep Kit for Illumina®，可用于NGS测序中DNA样本文库构建，采用高质量的酶学组成，改进型接头连接技术，以及具有强扩增效率的高保真酶，显著提高文库转化率与扩增效率，Input DNA范围为500 pg-1 μg，适用包含cfDNA、FFPE在内的所有样本进行文库构建，产品可以应用于全基因组测序、靶向捕获测序、Chip-seq等测序方法中。

mNGS具有不依赖于传统的微生物培养，直接对临床样本中的核酸进行高通量测序，能够快速、客观的检测临床样本中的较多病原微生物的特点。

全能核酸酶（Benzonase Nuclease），是一种核酸内切酶，可高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，能有效降低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的污染，且无蛋白酶活性残留。

牛血清白蛋白，称牛血清蛋白，又称第五组分，英文名称为Bovine Serum Albumin，也称Bovine albumin，或Cohn Fraction V，简称BSA。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用

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目前，实验室大多采用分光光度计来对DNA和RNA进行定量。虽然这种方法被广泛采用，但并不意味着它的读数是准确而可靠的。因为紫外吸光度测量不具有选择性，无法区分DNA、RNA或蛋白质，同时一些游离核苷酸或多余的盐离子也会影响检测的数值。此外，紫外分光光度计的灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量。基于此，Life Technologies（赛默飞世尔旗下）推出了Qubit，我们一起来探索一下qubit的神奇之处。

链霉亲和素是一种来源于阿维丁链霉菌（streptomyces avidinii）的生物素结合蛋白质，其非特异性结合远比亲和素低，且与蛋清亲和素在中性pH值具有净正电荷和包含大约7%的碳水化合物相比，链霉亲和素蛋白具有在中性pH值几乎没有净电荷，不含有碳水化合物等更有利的化学性质，所以它被广泛用来作为抗生物素蛋白的替代品。

核酸打断的方法可以分为机器法和试剂法。 其中机器法包含接触式和非接触式，接触式主要包括探头式和水浴超声两大类，这类方法比较实惠，但是直接接触样本会导致样本损耗和污染，非接触式主要包括Diagennode和Covaris这两个品牌，这类仪器和耗材的成本太高，单个样本的耗材成本达20-50元。 试剂法指的是采用片段化酶对核酸进行打断，这类方法成本较低，操作简便省时，只需要在样本中加入片段化酶，再反应一段时间即可完成反应。市面上报道可用于核酸打断的片段化酶有很多，包括应用于高通量测序的Tn5转座酶、NEB公司推出的Fragmentase、DNase I和Endonuclease V等。这里小翊就借花献佛，将试剂法核酸片段化酶的资料整理出来与大家分享。

试剂法指的是采用片段化酶对核酸进行打断，这类方法成本较低，操作简便省时，只需要在样本中加入片段化酶，再反应一段时间即可完成反应。市面上报道可用于核酸打断的片段化酶有很多，包括应用于高通量测序的Tn5转座酶、NEB公司推出的Fragmentase、DNase I和Endonuclease V等。这里小翊就借花献佛，将试剂法核酸片段化酶的资料整理出来与大家分享。

Protein A、Protein G是最常应用于抗体亲和纯化和免疫沉淀的蛋白。将Protein A、G分别固定在不同的介质上，或同时将Protein A、G共价偶联到介质表面，是从腹水、细胞培养物上清和血清中分离IgG和IgG亚家族的有效工具。Protein L源于细菌，能更广泛地结合各种类型以及亚类的免疫球蛋白，包括所有类型的IgG和单链可变区(ScFv)以及Fab片段。该蛋白只与抗体的kappa链结合而不会影响抗体的抗原结合位点，这一特性使其与蛋白A或蛋白G相比，能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体。

内参即内部参照（Internal Control），类似于荧光定量实验的内参基因，对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由看家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins)，它们在不同组织和细胞中的表达相对恒定，常用它作为检测目的蛋白表达水平变化时来做参照物。

在RT-qPCR实验中不论是实验小白还是老司机，都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂，还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析，真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢？小翊精心为大家总结了RT-qPCR实验的注意事项，希望助小伙伴们一臂之力。

PCR作为分子生物学最基础的研究方法之一。20世纪80年代凯利·穆利斯发明第一代PCR技术以来，“变性、退火、延伸”三部曲从未停歇。历经三十多年的演变，PCR技术已衍生出众多变体。小翊总结了一代PCR的一些常见类型，助力您的科学研究

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