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二代PCR（荧光定量PCR）因其高灵敏、特异性强的优势已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域，如传感染疾病、生殖遗传、肿瘤早筛伴随诊断、法医鉴定、动物疫病检测、食品安全监测、生物制品的评价等研究。在各类规模化生产/检测过程中，常规的qPCR反应体系配制步骤复杂，极易存在因错加、漏加或部分试剂失效而导致检测结果有误的风险，同时大量的冗杂重复操作大大降低工作效率。

细胞因子是由免疫细胞（如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等）和某些非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、APSC多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。

DNA甲基化是指生物体在DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase，DMT) 的催化下，以s-腺苷甲硫氨酸（SAM）为甲基供体，将甲基转移到特定的碱基上的过程。在哺乳动物中DNA甲基化主要发生在5’-CpG-3’的C上生成5-甲基胞嘧啶（5mC）。多项研究表明DNA低甲基化与早期肿瘤发生发展及抗癌耐药性相关，已成为极具应用潜力的生物标志物。

10月21日-22日，翌圣生物举办了第一期mRNA实操训练营。来自复旦大学、上海交通大学、华东理工大学等多所高校的近二十名学员，积极参加了此次mRNA实操训练营。本次实操训练营主要以线下讲座+实验带教+交流互动形式开展，涉及mRNA技术相关的理论讲座及实验操作。

mRNA（Messenger RNA或信使RNA）在人类生物学中起着基本作用，它转移存储在DNA中的指令来制活细胞所需的蛋白质。近年来，mRNA技术的发展应用持续得到关注，mRNA药物也以安全、高效、周期短等的优势，目前应用在疫苗、肿瘤免疫、罕见病等多个领域。

RNA测序，又称为转录组测序，是高通量测序中应用非常广泛的组学技术之一。其研究应用有：不同处理组差异基因表达分析；mRNA表达量的差异研究；mRNA结构上的差异（可变剪接、融合基因、点突变（SNP）。

克隆是英文“clone”或“cloning”的音译，而英文“clone”则起源于希腊文“Klone”，原意是指以幼苗或嫩枝插条。1963年J.B.S.Haldane在题为“人类种族在未来二万年的生物可能性”的演讲上采用“克隆（Clone）”的术语，把“克隆技术”带到了人们的视野中。

DNA-蛋白质互作研究解决方案（上）介绍了一些表观组学技术研究DNA-蛋白质互作，但是有了组学数据，通常还需要一些验证实验。

cfDNA（Circulating free DNA）简称循环游离DNA，是指循环血中游离于细胞外的部分降解了的机体内源性DNA。正常生理情况下，cfDNA主要来源于衰老凋亡细胞基因组DNA的降解，当机体发生疾病时，如恶性肿瘤、外伤、器官移植排异、组织器官衰竭和感染重大疾病等，异常坏死细胞会释放大量DNA进入血液循环。

类器官（organoids），是指利用干细胞、祖细胞、肿瘤细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。作为疾病模型，相比于传统2D疾病模型，类器官在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近，在多领域将发挥重要作用，诸如细胞治疗、药物研发、基因工程、免疫研究、组织再生等领域。

基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在1980年代中期由丹麦的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分别发现并具体描述基质胶【1】，其主要生产过程是用盐水提取/洗涤肿瘤匀浆后可溶性蛋白质，再用溶剂萃取产物中不溶性复合物，在低温下使用缓冲液进行透析后获得无色到淡黄色溶液。

基因的表达调控影响生物体的功能变化。其分为转录水平调控、转录后水平调控、翻译水平调控以及翻译后水平调控。而基因的表达调控受多方面的影响，其中一种就是DNA-蛋白质互作的影响。科学家们发现，DNA不仅可以编码蛋白质，还可以和蛋白质结合，调节基因活性，同时通过影响RNA转录来影响基因的表达；此外，DNA还可以作为各种化学修饰物的底物，对基因的沉默发挥一定的作用。蛋白质-DNA互作参与了很多体内的生物学过程，弄清DNA-蛋白质相互作用的机制，对于我们了解DNA转录调控和基因表达机制，揭示各种生命活动现象具有极其重要的指导作用。

克隆技术又称为“生物放大技术”，目前应用最广泛的技术为“分子克隆”，又称重组DNA技术，即通过重组技术将目的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生新的遗传性状的技术。

类器官研究遇难题？一线导师来解忧！

琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）进行日常核酸分析，也适用于蛋白分析应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

您还在为无法连接任意PCR产物和线性载体而烦恼吗？还在为不同末端的目的片段连接载体而苦苦寻找连接方法吗？翌圣新品零背景通用型TOPO克隆试剂盒，仅需5 min就能解决您的烦恼。它利用新一代拓扑异构酶(Topoisomerase)的原理，搭配高效的平末端化因子，能够快速克隆连接平末端产物和粘性末端产物。不同于传统的TA克隆，该试剂盒仅需5 min就能保证150 bp-5 kb的PCR产物快速完成插入片段和载体的连接反应，操作简单，连接效率极高，克隆阳性率接近100%。

类器官是在体外建立的与体内组织或器官高度相似的一种三维模型，在疾病建模、器官再生和个性化治疗领域发挥重要作用。类器官的培养需要多种细胞因子的维持，其中Wnt3a是最常用的因子之一，在大多数组织来源的类器官培养中起关键作用。

外泌体（exosome）是由细胞内多泡体(multivesicular body，MVB) 与细胞膜融合后，释放到细胞外基质中的膜性囊泡。外泌体天然存在于体液（如血液、唾液、尿液和母乳）中，直径约为30-150nm，膜内包含了多种蛋白质、脂质、核酸等生物大分子。外泌体能作为细胞间通讯的载体将这些分子从一个细胞传递到另一个细胞，从而实现细胞间的信息交流和功能调控。当外泌体释放到体液中，可以通过循环系统传播到其他细胞和组织，从而产生远程调控作用，如参与免疫应答、组织修复、疾病发生等过程。

常见的gDNA消化去除通常在正式反转录步骤之前，加入gDNA消化去除组分后，需在特定温度下反应一段时间，反应冷却后再加入相关的反转录组分进行反转录，步骤多且耗时通常在半小时左右。

荧光定量PCR是实验室中出镜率非常高的一种检测方法。该方法通过在PCR体系中添加荧光基团来记录DNA产物的累积情况，从而达到对PCR过程进行实时监控的目的，并且可以通过数据分析计算出起始模板量，这就是“荧光定量”中“定量”一词的来源。